22种抗菌消炎中药有效成分
对痤疮丙酸杆菌(P.acne)抑制作用及临床治疗痤疮观察及应用
贵州省美容美发协会、贵阳医学院 夏明静1 曹煌2 杨捷3
注1、贵阳医学院附属医院皮肤科[现在在美国密西西比大学攻读博士学位]550004贵阳
注2、贵阳医学院附属医院皮肤科[指导教师]
注3、贵阳医学院附属医院皮肤科[在读研究生]
[摘要]目的本研究旨在介绍在中医传统理论指导下通过中药有效成分对痤疮丙酸杆菌P.acne抑制实验和依据外用药物治疗痤疮的难点和特点，选择高敏的药物组成新剂型试用于临床治疗痤疮。方法进行22种中药有效成分药敏实验以丁香酚、按叶素为主要成分制成新制剂观察其临床疗效。结果丁香酚．按叶素对
P.acne具有高敏作用（抑菌圈直径>20mm);黄芩甙、大黄素等10种药物对P.acne即加具有中敏作用（抑菌圈直径在10-20mm间）；同时，丁香酚及按叶还具有协同抗P.acne作用。油镜下观察发现，抑P.acne后较抑制前细菌数量／单位面积明显减少，大部分细菌溶解死亡，失去正常形态。选出丁香酚及按叶素复方制剂治疗痤疮，临床观察显示：治疗组治愈率 93%(93／100),总有效率99%(99/100)；对照组（复方姜黄制剂),治愈率94％（47／50），总有效率98％（49／50）。治疗中未出现副作用（由于治疗时间短，应作继续追踪观察)。结论丁香酚、按叶素为主的制剂利用药物有效成分治疗痤疮，使软坚散结，减少疤痕，透皮吸收作用强，对囊肿结节型痤疮效果好，还能减少色素沉着。
[关键词]痤疮丙酸杆菌属有效成分中药
INHABITING FR0PINIBACTERIUM ACNES 0NAVAILABLE C0MP0SITI0NS 0F TRADITI0NAL CHI-NESE MEDICINE &0BXERVING AND APPLYING T0
THERAPY ACNE 0N A NEW PREPARATI0N XIA MingJing,CA0 Yu, YANG Jie,
et a1, Department ofdermatology, Affiliated Hospital of GuiyangMedical col lege 55000l[ABSTRACT] 0bjective: Based on Chinesetraditional Medicine theory, according to thetest of effective component s of Chineseherbs to inhibit P. acne, and the peculiarityand difficult point of topica1 medication totreat acne, the highest sensitive drugs arechosen to composite a new preparation. Methods:Doing the sensitivity test of 22 avai1ab1ecompositions of traditional chinese Medicine,selectung Eugenol and Cineole as the Maincomponents to make a new preparat ion, andobserving its cl inical curative effects.Results: Eugeno1 and Cineole have the high-est sensitive function (bacterial inhibitioncircle>20mm) and cooperat ive bac t er iostas is oBaica1in, Emodin and others have higher sen-sit ive funct ion (bacterial inhibi t ion circleis between l0--20) o With microscope, it isfound that the bacterium quantity in per areais reduced obvious1y after P. acne inhibitionk,most of bacterium are dissolved dead, and1ost their norma1 forms. C1 inica1 researchshowed that treat group cure rate 93%(93/
100), tota1 effctive rate 99% (99/l00): con-trol group cure rate 94%(47/50), total ef-
fective rate 98%(49/50) o The side reaction isuncovered (because the course of treatmentis limited, observation should be continued) o Conclusion: Use the avai lab1e composition
to treat acne, the new preparation solves thedifficu1ties on therapy, make hygiene and
treatment synchronization, malacia the scar1,enhance skin permeability--absorbency, reduce
the pigmentation, Moreover, the new prepara-tion has high stabi1ity. We think it has
actual effects and is worth expanding.[Key words] Acne P. acne Available compo-sition chinese Medicine
作者通过研究，论证中药对痤疮丙酸杆菌的抑制作用，选出有效中药成分组成新剂型试用于临床，取得显著效果。 材料和方法
一、实验室研究
（一）材料：枝叶素、姜黄精油，此两种药物均由贵阳舒美达制药厂提供。小梁碱、大黄酚、薯落皂贰、大黄素、丁香素、人参皂式Re、厚朴酚、苦参碱、齐墩果酸、氧化苦参碱、牡丹酚、三七皂甙Rl、龙胆苦式、和厚朴酚、葡甘聚糖、兜铃酸、黄革成、芦苦大黄式、黄民甲戌、丹参酮II、丹参酮I(以上均购自贵州省药物检验所)；对照物；甲硝唑、75%C2H5OH、无菌蒸馏水除氧化苦参碱、苦参碱、大黄素溶于水、小檗碱易溶于沸水，大黄酚溶于沸水己醇，其余18种有效成份皆溶于乃％酒精中。用分析大平精确称取药物20mg均溶于
4ml相应溶剂中，用无菌滤器滤过除菌备用。浓度为5mg/ml。挥发油：按叶素、姜黄精油、丁香酚0.5ml溶于4.5ml 75％酒精，浓度为10%。1.2实验菌株：共
四个菌株，1株为北京药品生物鉴定所提供的标准菌株（菌号为65102);其余3株为痤疮人皮损伤处分离得到的菌株。
（二）方法
1、标本采集选取痤疮病人皮损（脓疮、典型粉刺），用碘酊，75％酒精消毒后，用消毒的粉刺挤压器挤出内容物，立即称入Stuart运送培养基。
2、厌氧菌的培养、分离及鉴定将接种于运送培养基上的标本立即送入实验室，接种于THIO培养基中，用气袋法，置于厌氧罐内 37度培养72小时，以美兰作指示剂，把料为催化剂。
依据菌落形态（平板上出现灰白色、凸起、圆形、边缘整齐，表面光滑，直径为1.0mm左右的菌落入镜检为G+细菌，多呈棒状或网球拍状，进行初级鉴定，然后挑取单个菌落，转2块平板，一块置于厌氧罐中，厌氧条件下 37℃纯培养；另一块以 37度需氧培养；48小时后观察结果，见到厌痒培养的平板上出现形态均一，灰白色，细小，直径约1.0mm凸起的圆形、边缘稍齐的菌落，需氧培养下无细菌生长将菌作镜检，镜 下可见紫色杆菌，微弯呈棒状或杆状，可一端钝圆，一 端变细，着色不深，细胞为单个，可成对排列或排为“人”、“V”、“Y”、“入”等形状。又经耐氧试验、触酶 试验、吲跺试验、生化系列试验麦芽糖(-)、蔗糖(-) 葡萄糖(-)、甘露醇(+-)进行鉴定为痤疮丙酸杆菌。
将次代培养P.acne接种于LB液体培养基中，37 需氧培养24小时后发现液体混浊，取一环液体培养 基中菌液作镜检，并涂布于平板24小时后观察发现，平
板菌落形态，革兰氏染色及镜下观察细菌特征，触酶试 队丐除试验、耐氧试验、生化试验结果与前一致。
3．厌氧药敏试验[1]
3．1菌株接种：挑取1-2个菌落接种于LB平板上，37℃需氧培养 24小时。
3．2用于药敏试验的菌株制备：将需氧培养24小时的纯种P.acne用无菌生理盐水冲洗，冲洗液放入无菌试管中；采用麦氏比浊法比浊，比浊管用前需振摇10-12次，先比浊至3*10/ml，再用生理盐水衡释至10 5-10 6/ml备用。LB平板培养基接种：将灭菌的棉棒沾取菌液，于管壁上挤去多余菌液，在LB平极培养基上均匀涂布，并沿平皿边缘环扫一圈，盖好平皿，干燥2－3分钟。
3．3抑菌试验伦杯法x将无菌钢杯（直径为6删）轻放于平板培养基上，加满药液，放入37℃需氧培养24小时，发现平皿内无细菌生长，放入 37℃需氧培养
24小时，发现平皿内无细菌生长，继续37℃需氧培养24小时后见有抑菌圈形成。测抑菌圈直径，判定结果，将4组值取平均值。药敏试验一般分为四级，即高敏，中敏，轻敏，不敏／耐药，中药抗菌药敏等级划分，目前尚无统一标准，但可参照相应抗生素标准[2]。抑菌环直径>20mm为高敏，10－20mm中敏，<1Omm耐药。
二、临床研究
1．药物的配制：复方丁香酚配制剂组成：2％丁香酚，2％桉叶油，与吐温-80乳化．均质化，加入75％酒精制成。
2．临床资料：痤疮病人共150例，男42例，女108例。年龄分组 15-20岁40例，21-30岁87例，31-40岁23例。所有病人均具有痤疮临床表现，停用其它治疗药物半月以上。其中 80％病人在停药前采用多种药物治疗。治疗组采用丁香酚．枝叶油为主的配剂和／或涂膜剂治疗100例（寻常型痤疮70例，囊肿结节型30例人对照组采用姜黄为主的复方制剂治疗痤疮50例（寻常型痤疮30例，囊肿结节型20例)。二组采取随机分组法，每日3次，4周为一疗程。
3．疗效标准：据吴绍熙修改为Samnelon分级法进行病情分级连续用药1个月后判定疗效病情下降2级以上为显效，病情下降一级为有效，病损全部消退为治愈。
结果
3．1抑菌实验结果：抑制后细菌的镜下形态：P.acne大部分失去正常形态，细菌溶解死亡。可见大量碎片。（详见表1）
3．2丁香酚．按叶油制剂使用后还具有保健皮肤作用，使皮肤有光泽．细腻．有弹性洁白．且涂膜剂不含酒精，刺激更小，治疗痤疮效果更明显。(详见表2） 由公式[3]查X2界值表，得P＜3.84，所以P＞0.05，按a=0.05的水准，认为治疗组与对照组总有效率差异无显著性意义。
讨论 细菌对寻常痤疮患者的病损的形成具有重要意义[4][5]，与痤疮关系最密切的毛囊皮脂单位中微生物为痤丙酸杆菌P.acnes。所以减少毛囊中P.acnes是治疗的一个
[责任编辑:夏明静 曹煌等]
