生物美容化妆品的稳定性评价
朱小锐 黎丽坚 王军 潘晓明
（中国美容化妆品研发中心）
摘要：随着现代生物技术的快速发展，生物化妆品已经逐渐和正在成为化妆品发展的热点。对于生物化妆品，如何保证其生物因子活性得到最大程度的发挥和应用，建立一套正确评价生物化妆品稳定性的评价系统非常重要，本文简单介绍生物化妆品稳定性的检验方法。稳定性评价可以从两个方面来检验，一是对生物因子的活性检测，主要用于检测细胞因子类的活性功能来观察不同时间或不同条件影响下其稳定性的变化，二是对生物因子的完整性检测，主要用于检测活性因子本身的结构的完整性来检验其稳定性。两者可以互相结合起来综合判断生物因子的稳定性，可以根据不同的生物因子选择不同的判断方法。
关键词：生物 美容化妆品 稳定性 生物活性
随着现代生物技术的快速发展，在皮肤美容领域，生物化妆品已经逐渐和正在成为化妆品发展的热点，并以其安全、高效、天然和环保的特点被誉为第四代化妆品，成为引领化妆品发展的潮流。
生物化妆品主要有细胞提取类、细胞生长因子类和基因治疗类等产品，这些活性物质可以统称为生物因子。与传统化妆品中的化学物质相比，生物因子的特点在于：具有很好的安全性，它是在分子水平上发挥作用，从问题产生的源头发挥作用，有选择的对受损细胞进行修复或调整，改善和更新其组织和代谢功能等；而且，生物因子在很小的使用剂量上就可以发挥作用。但是生物因子与传统的一些化学活性物质相比，由于其自身结构的特点，对温度比较敏感，对于复配物质的相容性、PH值、离子条件等均有很高的要求。添加剂量低、稳定性相对比较脆弱。那么对于生物化妆品，如何保证其生物因子活性得到最大程度的发挥和应用，就显得尤为重要。建立起一套正确评价生物化妆品的稳定性的评价系统就很关键，可以为生物化妆品的配方选择、添加剂量、保存条件、使用期限等提供很好的参考意见。
对化妆品中生物因子的稳定性评价可以从两个方面来检测，一是对生物因子的活性检测，主要用于检测细胞因子类的活性功能来观察不同时间或不同条件影响下其稳定性的变化；二是对生物因子的完整性检测，主要用于检测活性因子本身的结构的完整性来检验其稳定性。两者可以互相结合起来综合判断生物因子的稳定性，可以根据不同的生物因子选择不同的判断方法。
一、生物活性检测：检测化妆品中是否含有某种生物因子及其含量的方法可分为三大类：
1.生物因子的活性检测法，检测生物因子的生物学活性及定量；
2.免疫学检测法，检测生物因子蛋白质的抗原特性；
3.分子生物学检测法，检测生物因子的mRNA的表达及定量。
1.生物因子的活性检测法：基于生物因子的生物学效应，反映生物因子在生物体内的活性状态及含量，例如促进或抑制细胞生长的作用、细胞毒性作用、抗病毒作用、诱导细胞趋化运动、诱导细胞生长并形成集落、诱导细胞表达膜分子、刺激细胞分泌其他细胞因子或其他分子等。
2.免疫学检测法：免疫学检测法检测的是生物因子蛋白质的抗原特性。一些生物因子以单体表现生物学活性，聚合后即失活；另一些生物因子聚合时才有活性，解聚后失活，因此使用免疫学检测法有利于在大分子水平上评价产品的活性。检测方法有酶联免疫检测法（ELISA），放射免疫检测法（RIA）等。具有微量、简单和快速等优点。免疫学方法不能替代检测上述生物因子活性检测的方法，两种方法从不同角度反映生物因子的存在，联合使用较好。
3.分子生物学方法检测：可检测生物因子的mRNA和基因表达定量。检测细胞因子mRNA的方法主要有PCR、原位杂交、Northern印迹试验和班点杂交试验。涉及到较多的分子生物学技术。
应当指出，以上三种检测方法的结果不一定完全平行。有时细胞虽然表达细胞因子的mRNA，但并不产生细胞因子。一些细胞只产生细胞因子的一条多肽链，而只有聚合的细胞因子才有生物学活性。细胞如果同时产生细胞因子可溶性受体，用生物学活性检测法测出的活性可能就很低。因此，应根据不同的目的选用不同的方法，最好用几种方法检测同样的样品。可以了解更多的信息。
二、生物因子的完整性检测，可以从生物因子物质本身的理化特性出发，选择适当的检测手段，检验生物因子在化妆品体系中随着时间和温度和变化，其分子结构、分子大小等的变化。目前随着分析技术、检测技术的飞速发展，越来越多的检测灵敏、分辨率高的仪器被开发出来，被应用到针对活性物的检测方面来。
首先要根据活性因子的特点，选择适当的分离手段将活性因子从化妆品基质中分离出来，例如，如果是水溶性的活性物，可以采用水相萃取的方法将其分离。
目前针对生物因子类完整性检测手段和方法主要有：
1.电泳：琼脂糖电泳以及PAGE电泳，可以从所带电荷及分子量的大小来判断，同时也可以定量，对分解或降解的生物因子有一个量的判断。该方法简单，易操作，成本低，但对于样本浓度有一定的要求。
2.液相色谱：根据生物因子的理化特点，所带电荷、极性大小、分子量等选择适当的分离介质和分离方法，HPLC反相吸附或者离子交换等。该种检测方法分辨率高，所需样本量少。
3.毛细管凝胶电泳：毛细管电泳是近年来发展起来的灵敏度高、可以对微量样本进行分析的检测手段，越来越多的被应用到药物分析、临床疾病诊断、DNA片段及序列分析等各个方面。它的特点是需要的样本量极少，分析快速，分辨率高，操作简单，成本低，消耗少。
总之，借助于以上的分析检测手段，对生物化妆品中生物因子的稳定性有很好的检测和评价，可以在产品的开发阶段中为配方师选定适合的配方提供依据，为产品的生产周期安排、产品的保存条件、销售环节以及针对客户的使用说明和培训等，提供很好的参考意见。
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